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分析PCRmax實時熒光定量檢測儀的操作規(guī)程
更新時間:2020-06-09   點擊次數(shù):1145次
  PCRmax實時熒光定量檢測儀是指通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤,實時監(jiān)測反應(yīng)過程的儀器。結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對產(chǎn)物進行定性和定量分析,計算待測樣品模板的初始濃度。在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程。

  PCRmax實時熒光定量檢測儀的操作規(guī)程:
  1、開機:
  a、依次打開電腦顯示器和電腦主機的電源開關(guān),進入Windows界面;
  b、接著打開AB7500儀器電源開關(guān),預(yù)熱10分鐘;
  c、點擊SDS軟件。
 
  2、檢測:
  a、選擇File-New-新建,在New Document Wizard窗口中,從Assay下拉列表中選擇反應(yīng)類型:相對定量,定量,等位基因鑒別或陽性陰性實驗,從Container下拉列表中選擇反應(yīng)板類型,在Default Plate Name中輸入反應(yīng)板文件名,點擊Next,選擇需要添加到反應(yīng)板文件的探針,點擊Next,為每個孔探針和任務(wù),單擊Finish。
  b、在Well Inspector-View-Well Inspector中輸入樣品名。
  c、運行相應(yīng)的反應(yīng)類型程序,選擇Instrument設(shè)定PCR條件。
  d、點擊Save下拉菜單下的Save As,輸入文件名,點擊save,關(guān)閉設(shè)置界面。
  e、按壓儀器托盤上的按壓位,待托盤彈出后,將所需檢測反應(yīng)板放入檢測孔位,再次按壓托盤使其滑入儀器,點擊Start開始檢測。
 
  3、結(jié)果分析:PCR反應(yīng)結(jié)束后自動保存結(jié)果,對擴增曲線進行分析,選擇Analysis-Analysis Settings 選擇Auto Ct,軟件自動為每個反應(yīng)空生成基線和閾值,也可根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline的Start值、End值,Threshold值,點擊Analyze進行再次分析。
  4、關(guān)機:實驗結(jié)束后取出反應(yīng)管,順序關(guān)閉AB7500軟件、定量PCR儀電源,關(guān)閉電腦。
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